REZUMATUL ETAPEI I / 2018

​

         În vederea realizării obiectivelor propuse:

         În cadrul activității 1.1. ”Selectarea și caracterizarea surselor marine pentru izolarea compușilor bioactivi (Pr. 1)”: s-au selectat două surse marine bogate în compuși biologic activi proteici și polizaharidici, respectiv gasteropodul Rapana venosa și algele macrofite verzi din genul Cladophora sp., după efectuarea unui studiu științific privind sursele valorificabile și a analizei fizico-chimice și biochimice a acestora (determinarea conținutului în proteine, glucide, lipide și glicozaminoglicani).

            În cadrul activității 1.2. ”Stabilirea tehnologiilor de obținere a extractelor proteice și polizaharidice din sursele selectate  (Pr. 1)”: s-au stabilit și optimizat parametrii tehnologici de extracție în vederea elaborării tehnologiilor de obținere a extractelor proteice (colagen, gelatină) și polizaharidice (polizaharide totale, glicozaminoglicani) din cele două surse marine. Tot în cadrul acestei activitați, s-au testat etapele tehnologice de obținere (pretratamente, extracția propriu-zisă și purificări) și s-au optimizat parametrii de lucru, precum: tipul și concentrația agentului de extracție, raportul țesut/solvent, raportul țesut/enzimă, tipul și concentrația substanței folosite pentru purificări, temperaturile și timpii de lucru.

            În cadrul activității 1.3. ”Elaborarea metodelor experimentale de caracterizare a extractelor proteice și polizaharidice din sursele selectate (Pr. 1)”: s-au elaborat metodele experimentale optime pentru caracterizarea extractelor proteice și polizaharidice obținute în activitatea anterioară, care au fost grupate în două tipuri de metode: 1. fizico-chimice și biochimice - dozarea proteinelor, determinarea hexozelor totale, conținutul în acizi uronici, electroforeza SDS-PAGE, evaluarea temperaturii de denaturare, analiza FTIR, respectiv 2. biologice - evaluarea biocompatibilității in vitro prin metode cantitative (tehnica Roșu Neutru, testul excluderii cu Albastru tripan, testul reducerii sărurilor de tetrazoliu, dozarea lactat dehidrogenazei) și calitative (microscopia optică și de fluorescență), precum și evaluarea activității antimicrobiene (metoda difuzimetrică). În cadrul acestei activitați s-au stabilit 4 protocoale de lucru pentru determinarea cantitativă a colagenului, dozarea glicozaminoglicanilor, evaluarea cantitativă a citoxicității și determinarea activității antimicrobiene.

            În cadrul activităților 1.4. ”Sinteza și caracterizarea silicei mezoporoase funcționalizate (Pr. 2)” și 1.5. ”Evaluarea biocompatibilității suporților pe bază de silice mezoporoasă funcționalizată (Pr. 2)”: au fost obținute 4 tipuri de particule de silice pură de tip MCM-41 și 4 tipuri de nanoparticule de silice funcționalizată cu grupări organice, preparate prin metoda co-condensării printr-o metodă originală. De asemenea, s-a elaborat o procedură de funcționalizare a particulelor de silice mezoporoasă de tip MCM-41 cu heteroatomi de Zn și Mg, doi ioni metalici implicați în procese biologice, care este de așteptat să îmbunătățească capacitatea de adsorbție a compuși bioactivi. Particulele de silice s-au caracterizat prin variate tehnici: difracție de raze X la unghiuri mici, analiză termică, spectroscopie FTIR. Particulele obținute prezintă porozitate ridicată, o structură ordonată a rețelei de pori, compoziții chimice variate, iar pe baza testelor de evaluare a viabilității celulare pe celule normale și tumorale, se poate aprecia că o parte din acestea se pot utiliza drept matrici pentru incapsularea unor principii active obținute din bioresurse marine sau viticole, în funcție de scopul urmărit.

Paralel cu desfășurarea acestor activități, în cadrul activității 1.6.”A) Recoltarea, pregătirea și caracterizarea materiilor prime marine de origine vegetală și B) și Recoltarea, pregătirea și caracterizarea materiilor prime de origine vegetală (tescovina) din zona Murtfatlar (Pr. 2)”: s-a recoltat și selectat material marin vegetal, macroalga verde din specia Ulva rigida (sin. Ulva lactuca), care a fost caracterizat din punct de vedere al conținutului de pesticide organoclorurate, metale grele și compoziția biochimică. S-au preparat extracte hidroalcoolice de algă Ulva rigida (sin. Ulva lactuca) și s-au determinat activitățile antioxidantă și antimicrobiană. Tot în cadrul acestei etape, s-a recoltat material vegetal viticol din zona Murfatlar, jud. Constanța. Din acest material biologic s-au preparat extracte alcoolice de diferite concentrații, prin metode diferite, din soiuri variate de struguri. Acestea au fost caracterizate din punct de vedere al conținutului de acid ascorbic și de polifenoli totali.

          Rezultatele obținute în cadrul acestei etape au determinat atingerea tuturor obiectivelor, acestea fiind promițătoare în perspectiva elaborării unor tehnologii de încapsulare a principiilor active din extractele preparate, care să aibă efectele terapeutice scontate.

          În concluzie, în cadrul etapei I a proiectului complex, s-au atins toți indicatorii de rezultat, iar valoarea rezultatelor obținute este susținută de activitatea de diseminare, prin publicarea 1 articol ISI Impact factor 2017/2018: 3,649; 8 lucrări comunicate la conferințe internaționale, din care 3 lucrări publicate în volumele conferințelor indexate ISI și 1 lucrare publicată în volum conferință (proceedings) neindexată. De asemenea, prin implementarea primei etape a proiectului s-a îmbunătățit infrastructura tuturor partenerilor și s-a diversificat oferta de servicii a acestora. Au fost angajați 6 noi tineri cercetători, cu o pregătire profesională foarte bună (doctoranzi și masteranzi), implicați atât în prezent, dar și pe viitor, în desfășurarea activităților proiectului complex.